Głównym bohaterem filmu “Hitman” jest Agent 47, którego zagrał aktor Timothy Olyphant, znany z ról w takich produkcjach jak choćby “Szklana pułapka 4.0”, “Dziewczyna z sąsiedztwa” czy “Krzyk 2”. Oprócz tego w obsadzie filmu “Hitman” pojawiają się również tacy bohaterowie jak Mike Whittier, Yuri Marklov, Nika Boronina, Jenkins czy Udre Belicoff, w których wcielili się kolejno Dougray Scott, Robert Knepper, Olga Kurylenko, Michael Offei oraz Henry Ian Cusick. W obsadzie filmu Hitman pojawia się również wiele postaci drugo- i trzecioplanowych takich jak Diana Burnwood (Lisa Jacobs), Bwana Ovie (Eriq Ebouaney), June (Sabine Crossen), kierowca FSB (Asen Blatechki), facet HRT (Vladimir Kolev) i córka Mike’a Whittiera (Viktoria Dimova).